一、質(zhì)譜MS
這里所說的質(zhì)譜指的是**質(zhì)譜,多肽質(zhì)譜鑒定指的就是利用質(zhì)譜法對多肽進(jìn)行鑒定。多肽質(zhì)譜鑒定主要是鑒定多肽的**結(jié)構(gòu),通過檢測多肽的氨基酸序列信息獲取多肽的序列或翻譯后修飾信息。多肽鑒定常用串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行。從代測樣品中提取出多肽以后,先用色譜法分離,然后離子源將分離后的多肽進(jìn)行離子化,之后**質(zhì)譜檢測完整多肽離子的質(zhì)荷比,合肥合生生物科技提供基于質(zhì)譜的多肽鑒定服務(wù)。
二、高效液相色譜 ( HPLC)
在適宜的色譜條件下應(yīng)用 HPLC可以在短時間內(nèi)完成對蛋白質(zhì)、多肽的分離, 更重要的是 HPLC能在制備規(guī) 模上生產(chǎn)具有生物活性的多肽。在多肽的分離、純化和鑒定中應(yīng)用*多的是反相高效液相色譜 (RP-HPLC),約95%是C18反相硅膠HPLC。其原理是基于多肽的疏水性,在不同介質(zhì)條件下,使不同的多肽得以分離,具有快速、高效和高回收的特點(diǎn),在分離和制備多肽及蛋白質(zhì)上有獨(dú)特的優(yōu)越性。
合肥合生生物整個工藝中會有三次HPLC確認(rèn),切割之后會進(jìn)行MS和HPLC分析,制備之后會再次檢測HPLC交付QC檢測中心,經(jīng)過再次MS確認(rèn)后凍干,凍干之后,在發(fā)貨之前會進(jìn)行*后一次檢測,并提供檢測報告,如下:
三、液質(zhì)聯(lián)用LC-MS
液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(liquid Chromatograph Mass Spectrometer),簡稱LC-MS,它以液相色譜作為分離系統(tǒng),質(zhì)譜為檢測系統(tǒng),樣品在質(zhì)譜部分和流動相分離,被離子化后,經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開,經(jīng)檢測器得到質(zhì)譜圖。液相色譜(LC)能夠有效的將有機(jī)物待測樣品中的有機(jī)物成分分離開,而質(zhì)譜(MS)能夠?qū)Ψ珠_的有機(jī)物逐個的分析,得到有機(jī)物分子量,結(jié)構(gòu)(在某些情況下)和濃度(定量分析)的信息。強(qiáng)大的電噴霧電離技術(shù)造就了LC-MS質(zhì)譜圖十分簡潔,后期數(shù)據(jù)處理簡單的特點(diǎn)。LC-MS是有機(jī)物分析實(shí)驗(yàn)室,藥物、食品檢驗(yàn)室,生產(chǎn)過程控制、質(zhì)檢等部門必不可少的分析工具
四、核磁C\H譜
合肥合生生物提供多肽核磁1H NMR和13C NMR譜圖,是*重要的參數(shù)之一,它可以提供磁性核的類型信息,既包括磁性核電子結(jié)構(gòu)信息,也包括磁性核中成鍵狀態(tài)的信息。通過化學(xué)位移可以直接判別氫譜中甲基氫、芳?xì)?、烯氫和醛氫等等。通過化學(xué)位移,尤其是C化學(xué)位移可以推導(dǎo)出有機(jī)化合物的基本骨架和結(jié)構(gòu)。
五、MALDI-TOF
譜分析**步是把待分析的物質(zhì)離子化,然而對于多肽的大分子物質(zhì),例如ESI在電離過程中會使大分子離子發(fā)生碎裂形成碎片。所以MALDI-TOF很好的解決這個問題,它通過引用基質(zhì)分子,不產(chǎn)生或者較少產(chǎn)生離子碎片,它能更準(zhǔn)確的測定多肽大分子物質(zhì)。
其原理:當(dāng)用一定強(qiáng)度的激光照射樣品與基質(zhì)形成的共結(jié)晶薄膜,基質(zhì)從激光中吸收能量,基質(zhì)與樣品之間發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移使得樣品分子電離。它是一種軟電離技術(shù)。
六、肽含量檢測(元素分析)
多肽含量則是指目標(biāo)多肽在產(chǎn)品中的凈含量,一般以N元素分析或氨基酸分子的方法來檢測。
七、二級質(zhì)譜測序LC-MS/MS
蛋白先經(jīng)胰蛋白酶消化成肽段,肽段在質(zhì)譜儀中離子化后,會帶上一定量的電荷,通過檢測器分析,可得到各肽段的質(zhì)荷比(m/z),即**質(zhì)譜圖;為獲得肽段更詳細(xì)的序列信息,部份肽段再次被破碎和分析,產(chǎn)生二級質(zhì)譜圖。*后采用質(zhì)譜檢索軟件選擇相應(yīng)的蛋白數(shù)據(jù)庫,對獲得的全部質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,同時以打分的形式將鑒定到的蛋白依次排列。
我們主要提供:多肽合成、定制多肽、同位素標(biāo)記肽、人工胰島素、磷酸肽、生物素標(biāo)記肽、熒光標(biāo)記肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC等)、目錄肽、偶聯(lián)蛋白(KLH、BSA、OVA等)、化妝品肽、多肽文庫構(gòu)建、抗體服務(wù)、糖肽、訂書肽、藥物肽、RGD環(huán)肽等。
合肥合生生物科技專注于多肽合成方向研發(fā)十余年,從中也積累了豐富的多肽合成經(jīng)驗(yàn),也屢次獲得合肥市嘉獎與表揚(yáng),如有多肽合成方面的需求,可以直接聯(lián)系小編VX:19956525566,也可百度搜索“合肥合生生物”。