用哪種溶劑溶解合成肽一直是困擾多肽工作者的一個難題。根據(jù)不同的氨基酸序列,可以參考以下方法來溶解合成肽。*好是先將少量肽用水溶液溶解,不要一次將全部樣品都溶解掉。
1. 將酸性氨基酸Asp (D),Glu (E)和C端-COOH的值定為-1。
2. 將堿性氨基酸Arg (R),Lys (K),His (H)的值定為+1。
3. 計算肽中全部電荷量。
4. 如果肽的全部電荷為正值,則肽呈堿性,可以先用水溶解。如果肽不溶于水,可以用10%乙酸或者更高濃度的乙酸溶解。如果肽一點都不溶,加入TFA(<50ml)助溶,并用去離子水稀釋至1ml。
5. 如果肽的全部電荷為負(fù)值,則肽呈酸性,可以先用水溶解。如果肽不溶于水,加入NH4OH(<50ml) 助溶,并用去離子水稀釋至1ml。
6. 如果肽的全部電荷為0,則肽呈中性。中性肽需要用乙腈、甲醇、異丙醇等有機(jī)溶劑來溶解,也可以加入變性劑(如尿素、鹽酸胍等)。
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