肽的溶解性
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以我們的經(jīng)驗(yàn)，溶解肽是一個(gè)很重要的環(huán)節(jié)。如果溶解不當(dāng)可能導(dǎo)致肽損失或者實(shí)驗(yàn)失敗。肽的溶解性主要取決于肽的序列，所以，如果實(shí)驗(yàn)允許，肽序列中至少應(yīng)包含20%的帶電殘基以增加其溶解度。
在使用之前，客戶可以遵循以下三個(gè)基本原則來選擇合適的溶劑溶解多肽。首先，所選溶劑一定能充分溶解多肽；其次，所選溶劑能與實(shí)驗(yàn)條件兼容；*后，所選溶劑不能與肽反應(yīng)，也不能使肽降解。只要肽的量允許，可以先用少部分肽溶解，然后再將全部樣品溶解。如果需要從溶劑中回收肽，可以選擇 一種初始溶劑使其在凍干后容易去除。
以下建議或許對(duì)您溶解肽有所幫助：
1. 少于5個(gè)氨基酸的肽一般溶于水溶液，強(qiáng)疏水的氨基酸（W，I，L，F，M，V，Y）除外。
2. 如果帶電氨基酸平均分布于全部序列中，那么含有>25%帶電氨基酸（E，D，K，R，H）的親水肽和含有<25%疏水氨基酸的肽一般都能溶于水溶液。多肽的純化系統(tǒng)一般為0.1%TFA/水和0.1%TFA/ ACN。因此，如果肽溶解在沒有緩沖能力或者緩沖能力很弱的緩沖液中，結(jié)果可能導(dǎo)致肽溶液呈酸性。在使用別的方法溶解肽時(shí)務(wù)必使溶劑的pH值近乎中性。酸性肽（E+D殘基數(shù)多于K+R+H殘基 數(shù)）和堿性肽（K+R+H殘基數(shù)多于E+D殘基數(shù)）在中性pH值條件下比在酸性pH值下更易于溶解。
3. 對(duì)于疏水氨基酸含量為50%～75%的肽，即使序列中含有>25%帶電氨基酸也有可能不溶于水或者部分溶解。*好先把肽溶于*少量的強(qiáng)有機(jī)溶劑如DMF、ACN、異丙醇、乙醇、乙酸、4-8M GdnHCl、 尿素，或者DMSO（序列中沒有C，W，M時(shí)），及其它類似的有機(jī)溶劑中。*好將溶解肽的有機(jī)溶 劑緩慢地逐滴加入水溶液中，如果溶液變渾濁，可能是達(dá)到了溶解極限，繼續(xù)溶解就沒什么用了。 需要注意的是，*開始選擇的溶劑應(yīng)該與實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)兼容。
4. 疏水氨基酸含量>75%的強(qiáng)疏水肽一般也不溶于水溶液。此類肽也應(yīng)該先用強(qiáng)有機(jī)溶劑（如TFA，甲酸）溶解，如果將其加入到水溶液中也可能產(chǎn)生沉淀。*后的肽溶液可能需要高濃度的有機(jī)溶劑使之變性，而有機(jī)溶劑一般不用于活細(xì)胞的生物功能研究。
5. S，T，E，D，K，R，H，N，Q，Y含量高（>75%）的多肽序列容易形成多余的分子間氫鍵網(wǎng)絡(luò)， 在濃的水溶液中容易形成凝膠。此類肽可以用步驟3所述方法溶解。為了減少溶解中可能出現(xiàn)的問題，建議客戶從設(shè)計(jì)上和序列上多加考慮，以改善肽的溶解度。